сетки Горяева и Устройство камеры. Камера Горяева представляет собой толстое предметное стекло, прорезанное четырьмя поперечными бороздами. Борозды дробят стекло на пластинки — две боковые и среднюю. Средняя пластинка на 0,1 мм ниже боковых. Она поделена поперечной бороздкой на 2 равные части. На каждой половине средней пластинки нанесена сетка Горяева. Принадлежностью’ камеры помогает шлифованное покровное стекло. Его направляться наложить так, дабы оно покрыло обе боковые и среднюю пластинки. Нажимая громадными пальцами на края стекла, его притирают к боковым пластинкам до появления радужных колец (кольца Ньютона).
Так как боковые пластинки выше средней, между нею и покровным стеклом остается щель. Это и имеется камера, в которую заливают разведенную кровь. Глубина камеры 0,1 мм.
Нанесенная на дно камеры сетка Горяева квадратная. Сторона ее — 3 мм, площадь-—9 мм». Сетка разграфлена на 225 громадных квадратов—15 по горизонтали и 15 по вертикали. Часть громадных квадратов (через два на третий) поделена на 16 малых квадратов. Сторона малого квадрата равна 1/20 мм .
Техника подсчета. Верное заполнение счетной камеры разведенной кровью снабжает точность подсчета форменных элементов. Перед заполнением камеры содержимое пробирки перемешивают, вращая ее между ладонями в течение 2 мин. Разведенную кровь наносят на среднюю пластинку камеры пастеровской пипеткой с баллоном либо стеклянной палочкой, помещая ее около края покровного стекла. По закону капиллярности жидкость затекает под стекло, заполняя камеру.
По окончании заполнения камеру необходимо положить на стол на 2—3 мин, пока перемещение жидкости в ней не закончится, и клетки не расположатся без движений на фоне квадратов сетки. При заполнении камеры жидкость не должна стекать в борозды. Недопустимо попадание в камеру пузырьков воздуха.
Подсчет создают под малым повышением микроскопа (об.8, ок.10 либо 15), конденсор должен быть опущен, а диафрагма закрыта.
Вероятные неточности при подсчете:
Правила:
-к данному квадрату принадлежат клетки, находящиеся большей собственной половиной внутри него;
— клетки, поделённые пограничной линией пополам, считают лишь на верхней и левой границе квадрата;
— клетки же, лежащие большей собственной половиной вне данного квадрата не вычисляют вовсе.
Принцип. Подсчет эритроцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови, исходя из количества квадратов и разведения крови.
Реактивы. 0,9 % раствор хлорида натрия
Особое оборудование. 1. Счетная камера Горяева. 2. Микроскоп.
Движение изучения. Разводят исследуемую кровь в 200 раз. Для этого в сухую пробирку отмеривают 4 мл реактива 1 либо 2. Пипеткой набирают 0,02 направляться крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой либо марлей, и кровь выдувают на дно пробирки; пипетку тщательно промывают в верхнем слое жидкости, повторно набирая ее и выдувая в пробирку, содержимое пробирки перемешивают и оставляют находиться до момента счета (рекомендуется вычислять эритроциты в ближайшие 2—3 ч по окончании взятия крови, а при гемолитических и. В 12-дефицитных анемиях — сразу после взятия, поскольку эритроциты смогут разрушиться). Недопустимо оставлять забранную кровь с несосчитанными эритроцитами на следующий сутки, поскольку эритроциты частично разрушаются.
Подготавливают счетную камеру: протирают насухо камеру с сеткой и покровное стекло, затем покровное стекло притирают к камере, легко надавливая на стекло так, дабы по краям его показались радужные полосы (это свидетельствует о требуемой высоте камеры — 0,1 мм).
Заполняют счетную камеру разведенной кровью: предварительно пара раз тщательно встряхивают содержимое пробирки, после этого пастеровской пипеткой либо стеклянной палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла, смотря за тем, дабы она равномерно без пузырьков воздуха заполнила всю поверхность камеры с сеткой, не затекая в бороздки. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении 1 мин (ДЛЯ ОСЕДАНИЯ эритроцитов).
Для подсчета эритроцитов — микроскоп (объектив на 8х, окуляр на 10Х), находят верхний левый край сетки. Счет создают в 5 громадных квадратах, поделённых на 16 малых, т. е. в 80 малых квадратах.
Прак. навык по физиологии: Кол-во эритроцитов
