Предпосылкой к формированию клеточной инженерии у животных и человека явилась разработка способов культивирования их соматических клеток на неестественных питательных средах, и получение гибридов соматических клеток, включая межвидовые гибриды. Со своей стороны, удачи в культивировании соматических клеток повлияли на изучение половых клеток и оплодотворение у животных и человека. Начиная с 60-х гг., в нескольких лабораториях мира были выполнены бессчётные опыты по пересадке ядер соматических клеток в яйцеклетки, искусственно лишенные ядер. Результаты этих опытов довольно часто были противоречивы, но в целом они стали причиной открытию свойства клеточных ядер снабжать обычное развитие яйцеклеток (см. гл. VIII).
На базе результатов изучения развития оплодотворенных яйцеклеток в 60-е гг. были начаты кроме этого изучения по выяснению возможности оплодотворения яйцеклеток вне организма матери. Весьма скоро эти изучения стали причиной открытию возможности оплодотворения яйцеклеток сперматозоидами в пробирке и предстоящего развития грамотных таким методом зародышей при имплантации их в матку дамы. Предстоящее совершенствование созданных в данной области способов стало причиной тому, что рождение «пробирочных» детей стало действительностью. Уже к 1981 г. в мире было рождено 12 детей, жизнь которым была дана в лаборатории, в пробирке. На данный момент данный раздел клеточной инженерии взял громадное распространение, а количество «пробирочных» детей образовывает уже десятки тысяч. У нас работы по получению «пробирочных» детей были начаты в 1986 г. В первой половине 90-ых годов двадцатого века была создана методика получения монозиготных близнецов человека in vitro, методом разделения эмбрионов на блас-томеры и доращивания последних до 32 клеток, по окончании чего они могли быть имплантированы в матку дамы.
Под влиянием результатов, которые связаны с получением «пробирочных» детей, у животных также была создана разработка, названную трансплантации эмбрионов. Она связана с разработкой метода индукции полиовуляции, способов имплантации зародышей и искусственного оплодотворения яйцеклеток в организм животных — приемных матерей. Сущность данной технологии сводится к следующему. Высокопродуктивной корове вводят гормоны, в следствии чего наступает полиовуляция, заключающаяся в созревании сходу 10—20 клеток. После этого яйцеклетки искусственно оплодотворяются мужскими половыми клетками в яйцеводе. На 7-8-й сутки зародышей вымывают из матки и трансплантируют в матки вторым коровам (приемным матерям), каковые после этого дают жизнь телятам-близнецам. Телята наследуют генетический статус собственных настоящих своих родителей.
Второй областью клеточной инженерии у животных есть получение трансгенных животных. самый простой метод получения таких животных содержится во введении в яйцеклетки исходных животных линейных молекул ДНК. Животные, развившиеся из оплодотворенных так яйцеклеток, будут содержать в одной из собственных хромосом копию введенного гена. Больше того, они и будут передавать данный ген по наследству. Более сложный метод получения трансгенных животных создан на мышах, различающихся по окраске шерстного покрова и сводится к следующему. Сначала из организма беременной серой мыши извлекают четырехдневных зародышей и измельчают их на отдельные клетки. После этого из эмбриональных клеток извлекают ядра, переносят их в яйцеклетки тёмных мышей, предварительно лишенные ядер. Яйцеклетки тёмных мышей, которые содержат чужие ядра, помещают в пробирки с питательным раствором для предстоящего развития. Развившиеся из яйцеклетки тёмных мышей зародыши имплантируют в матки белых мышей. В выполненных по данной методике опытах от пяти белых мышей («приемных матерей») было получено 36 мышей, среди которых трое были серыми. Так, в этих опытах удалось взять клон мышей с серой окраской шерстного покрова, т. е. клонировать эмбриональные клетки с заданными особенностями. В § 35 мы разглядели результаты оплодотворения искусственно лишенных ядер яйцеклеток овец ядерным материалом соматических клеток животных этого же вида. В частности, из яйцеклеток овец удаляли ядра, а после этого в такие яйцеклетки вводили ядра соматических клеток (эмбриональных, плодовых либо клеток взрослых животных), по окончании чего оплодотворенные так яйцеклетки вводят в матки взрослых овец. Рождающиеся ягнята были аналогичными овце-донору. Как было отмечено в § 35, такое получение трансгенных животных представляет собой прямой путь клонирования животных с хозяйственно-нужными показателями, включая особей определенного пола.
Трансгенные животные взяты кроме этого при применении исходного материала, принадлежащего различным видам, например, известен метод передачи гена, осуществляющего контроль гормон роста, от крыс в яйцеклетки мышей, и метод комбинирования блас-томеров овцы с бластомерами козы, что стало причиной получению гибридных животных (ковец). Эти опыты говорят о возможности преодоления видовой несовместимости на самых ранних этапах развития. Особенно заманчивые возможности раскрываются (в случае если видовая несовместимость будет преодолена всецело) на пути оплодотворения яйцеклеток одного вида ядрами соматических клеток другого вида. Речь заходит о настоящей возможности получения хозяйственно-полезных гибридов животных, которых нереально взять методом скрещиваний.
направляться подчернуть, что ядерно-трансплантационные работы еще не весьма действенны. Опыты, выполненные на млекопитающих и земноводных, в целом продемонстрировали, что их результативность есть маленькой, причем она зависит от несовместимости между донорскими ядрами и реципиентными овоцитами. Помимо этого, препятствием на пути к удачам являются кроме этого образующиеся хромосомные аберрации в трансплантированных ядрах на протяжении предстоящего развития, каковые сопровождаются смертью трансгенных животных.
На стыке работ по изучению гибридизации клеток и иммуноло-гических изучений появилась проблематика, которая связана с изучением и получением так называемых моноклональных антител. Как отмечено выше (см. § 96), антитела, продуцируемые организмом в ответ на введение антигена (бактерии, вирусы, эритроциты и т. д.), являются белками , именуемые иммуноглобулина-ми и составляющие фундаментальную часть защитной совокупности организма против возбудителей заболеваний. Но любое чужеродное тело, вводимое в организм, является смесью различных антигенов, каковые будут возбуждать продукцию различных антител. К примеру, эритроциты человека владеют антигенами не только для групп крови А (II) и В (III), но и многими вторыми антигенами, включая резус-фактор. Потом, белки клеточной стены бактерий либо капси-да вирусов также будут функционировать в качестве различных антигенов, вызывающих образование различных антител. Одновременно с этим лимфо-идные клетки иммунной совокупности организма в большинстве случаев представлены клонами. Значит, кроме того лишь по данной причине в сыворотке крови иммунизированных животных антитела всегда являются смесь, складывающуюся из антител, продуцируемых клетками различных клонов. В это же время для практических потребностей нужны антитела лишь одного типа, т.е. нужны так именуемые моноспецифические сыворотки, которые содержат антитела лишь одного типа, либо, как их именуют, моноклональные антитела.
В отыскивании способов получения моноклональных антител швейцарскими исследователями в 1975 г. был открыт метод получения гибридов между лимфоцитами мышей, иммунизированных тем либо иным антигеном, и культивируемыми опухолевыми клетками костного мозга. Такие гибриды стали называться «гибридомы». От «лим-фоцитарной» части, представленной лимфоцитом одного клона, одиночная гибридома наследует свойство приводить к образованию нужных антител, причем одного типа, а благодаря «опухолевой (миэломной)» части она делается талантливой, как и все опухолевые клетки, очень долго размножаться на неестественных питательных средах, давая бессчётную популяцию гибридом. На рис. 229 продемонстрирована схема выделения клеточных линий, синтезирующих моноклональные антитела. Линии мышиных клеток, синтезирующих моноклональные антитела, выделяют методом слияния миеломных клеток с лимфоцитами из селезенки мыши, иммунизированной за пять дней до этого желаемым антигеном. Слияние клеток достигают смешиванием их в присутствии полиэтиленгликоля, что индуцирует слияние клеточных мембран, а после этого в высеве их на питательную среду, разрешающую размножение и рост лишь гибридных клеток (гибридом). Размножение гибридомы разводят в жидкой среде, где они растут потом и секретируют антитела в культуральную жидкость, причем лишь одного типа, к тому же в неограниченных количествах. Эти антитела стали называться моноклональных.
Громадный #СБОРНИК песен мультиков для детей про животных машинки и трактор поезда
